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第 5 期              李孙勇，等: 2-取代-4-氯-5-芳基-2H-1,2,3-三唑类化合物的合成及生物活性                          ·953·


            （2 mmol），DMF 10 mL，NCS（2.6 mmol），50  ℃             2    结果与讨论
            下反应 8~12 h（TLC 监测反应进程）。反应完成后，
            将冷却至室温的反应液转入 100 mL 水中，乙酸乙酯                        2.1    中间体及目标化合物的合成方法
            （40 mL×3）萃取，合并有机相，无水硫酸镁干燥，                             中间体Ⅱa~Ⅱc 的合成，当前有两种方案：
            抽滤，减压除去溶剂得粗品。以石油醚与乙酸乙酯                             （1）两步法。以甲醇为溶剂，芳醛与硝基乙烷在缚
            的混合溶液〔V(石油醚)︰V(乙酸乙酯) = 10︰1〕为                      酸剂 NaOH 作用下先转化为硝基烯，再在高沸点溶
            洗脱剂，经硅胶柱层析得中间体Ⅲa~Ⅲc。                               剂 DMSO 中与叠氮化钠进行关环反应               [25-26] 。由于含
                 4-氯-5-苯基-2H-1,2,3-三唑（Ⅲa）：白色固体，                有两个反应步骤、耗时长，反应操作中应注意在第
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            收率 58%，m.p.  137~138  ℃。 HNMR  (400  MHz,          一步控制温度及 NaOH 水溶液的滴速，关环反应后
            CDCl 3 ), : 7.26~7.93 (m, 5H, PhH), 11.72(s, 1H, NH)。   处理需萃取、柱层析等操作，相对复杂。（2）一锅
                 4-氯-5-(2-氯苯基)-2H-1,2,3-三唑（Ⅲb）：浅褐              合成法。以 DMSO 为溶剂，通过一锅法反应制得Ⅱ
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            色油状物，收率 98%。 HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), :           a~Ⅱc。最好使用新购无水 AlCl 3 ，反应严格防水，
            7.26~7.51 (m, 4H, PhH), 13.58 (s, 1H, NH)。         注意反应原料添加顺序，即在 3 种原料添加完毕后，
                 4-氯-5-(3-硝基苯基)-2H-1,2,3-三唑（Ⅲc）：白              搅拌下最后添加无水 AlCl 3 。因在加入 AlCl 3 时可能
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            色固体，收率 54%，m.p.  161~162  ℃。 HNMR                  会产生火花，故不宜一次性加入，应分批多次缓慢
            (400 MHz, CDCl 3 ) ,: 7.26~8.86 (m, 4H, PhH), 11.76   加入，以防危险。反应温度控制在 70~ 75 ℃为宜，
            (s, 1H, NH)。                                       温度过低反应不完全，温度过高则反应体系复杂、
            1.2.3    目标化合物（Ⅳa~Ⅳo）的合成                           副产物增多。本研究采用一锅法反应并有 87%以上
                 参照文献[21-22]方法，在 50 mL 反应瓶中，分                  的收率。
            别加入中 间体 4- 氯 -5- 苯基 -2H-1,2,3- 三唑Ⅲ a
                                                                   中间体Ⅱa~Ⅱc 的结构都存在异构现象，其
            （2 mmol）、丙酮 15 mL、碳酸钾（4 mmol），常温                   1 HNMR 谱图如图 1 所示。
            搅拌 15  min 后，加入卤化物（2.6  mmol），加热回
            流反应 6~10 h（TLC 监测反应进程)。反应完成后，
            将冷却至室温的反应液经硅藻土过滤，用 5~8  mL
            丙酮洗涤滤饼，减压除去溶剂得粗品，以石油醚与
            乙酸乙酯的混合溶剂〔V(石油醚)︰V(乙酸乙酯) = 10
            ︰1〕为洗脱剂，经硅胶柱层析得目标化合物Ⅳa~
            Ⅳe。运用相同制备方法，由Ⅲb 制得Ⅳf~Ⅳj，由Ⅲc
            制得Ⅳk~Ⅳo。
            1.3   目标化合物的抑菌活性实验
                 抑菌活性实验在湖南化工研究院完成。目标化
            合物Ⅳa~Ⅳo 对小麦赤霉病菌（Gibberella zeae）、辣

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            椒疫霉病菌（Phytophythora capsici）、烟草赤星病菌                       图 1    中间体Ⅱa~Ⅱc 的 HNMR 谱图
                                                                         1
            （Alternaria alternata）、黄瓜灰霉病菌（Botrytis                Fig. 1    HNMR spectra of intermediates  Ⅱa~Ⅱc
            cinerea）、水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）和油
            菜菌核病菌（Sclerotonia sclerotiorum）6 种作物病                  由图 1 可知，Ⅱa 中 NH 的化学位移 δ 分别为
            菌进行了离体抑菌活性实验。参照生物活性测试标                             15.39 和 15.01，Ⅱb 中 NH 的化学位移 δ 分别为 15.57
            准 NY/T 1156.6-2006 [23] ，采用菌丝生长速率测定法       [24] ，  及 15.24，Ⅱc 中 NH 的化学位移 δ 分别为 15.58 及
            培养基为马铃薯琼脂培养基（PDA）。具体操作步                            15.27。
            骤：各取 500  mg/L 化合物药液 2  mL，加入温度为                       在中间体Ⅲa~Ⅲc 的制备中，选用乙酸异丙酯、
            45  ℃的 38 mL PDA 中，制成终质量浓度为 25 mg/L                DMSO 及 DMF 溶剂并在 25、50、90  ℃下尝试氯化
            的含药培养基平板。待其凝固后，于培养基中心接                             反应。结果表明，在 DMF 溶剂中、50  ℃下，顺利
            种直径 6.0 mm 的真菌菌种，置于 28  ℃恒温培养箱                     制得中间体Ⅲa~Ⅲc。
            中培养 96  h。运用十字交叉法测量菌落直径，与空                             第三步烷基化反应，以丙酮为溶剂、K 2 CO 3 作
            白对照进行比对，并分别以已知物 4-氯-5-苯基-2H-                       缚酸剂，通过亲核取代容易制得目标化合物Ⅳa~
            1,2,3-三唑及商品化品种苯醚甲环唑为对照药。                           Ⅳo，该转化条件温和、操作简单并有中等以上的收
            菌丝生长抑制率/%=(对照菌落直径处理菌落直径)/(对照菌落直径6)×100           率（53%~94%）。
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